液相色譜固定相分類的具體解析
液相色譜固定相一般分為5種類型，這五種不同的固定相又將液相色譜分為各具特色的液相色譜。
1.正相色譜
八十年代初，人們使用的正相色譜固定相硅膠和吡啶硫氰酸鎳鹽的絡(luò)合物晶體能與芳香族化合物形成包合物用于分離芳香族含氮異構(gòu)體和膽甾醇晶體。已有人[1]將焦炭吸附劑作為填料和鍵合硅膠作過(guò)比較并研究其熱力學(xué)機(jī)理。具有離子化或非離子化功能團(tuán)的大孔聚合物也開(kāi)始應(yīng)用于液相色譜，這些聚合物在整個(gè)酸堿范圍內(nèi)穩(wěn)定，其中一個(gè)缺點(diǎn)是當(dāng)溶劑改變時(shí)，它們會(huì)熱脹冷縮，但是其主要的分析方面用途，即從水中收集痕量研究化合物是沒(méi)有題目的，通過(guò)適當(dāng)?shù)奶幚硌b進(jìn)色譜柱，一些物質(zhì)出現(xiàn)過(guò)度的峰帶變寬，而另一些則出現(xiàn)尖、窄的峰帶和高分離度，在強(qiáng)堿性大孔樹(shù)脂中120分鐘內(nèi)可分離100種尿液中紫外吸收物質(zhì)[2]。有人將各種鏈長(zhǎng)度的碳?xì)渑湮惑w鍵合到硅膠上，根據(jù)鏈?zhǔn)欠切?yīng)研究保存值的影響，也有過(guò)類似的報(bào)道，將C22鍵合相以及制備鍵合相擔(dān)體各種條件作過(guò)比較，其鍵長(zhǎng)度和吸附自由能成線性關(guān)系。一般地，堿溶液會(huì)破壞硅膠，烷基胺比季銨鹽更會(huì)腐蝕硅膠填料，故通過(guò)加填有5mm硅膠的短預(yù)柱來(lái)洗脫堿性溶液。Kataev等[3]用聚三氟苯乙烯涂成的硅膠微粒基質(zhì)并應(yīng)用到鹵代芳烴、多肽和蛋白質(zhì)的分離。1993年11月，Majors討論了在日本發(fā)展迅速的HPLC聚合物填料。Hosoya制備了大孔聚合乙烯-對(duì)-叔丁基苯甲酸丁酯微球和兩種別的聚合物微球的性能以及更多的C18HPLC固定相。
2.反相色譜
固定相的研究進(jìn)進(jìn)九十年代更是熱火朝天。這方面的研究報(bào)道遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過(guò)活動(dòng)相的研究，人們不斷探索保存過(guò)程及相關(guān)烷基鍵結(jié)構(gòu)的復(fù)雜性和可能制得的各種新型固定相。Bolok和其合作者從統(tǒng)計(jì)技術(shù)研究反相色譜柱的老化過(guò)程。Montes等評(píng)價(jià)了一種硅氫化物介質(zhì)的硅氫烯制備烷基鍵合相，更早時(shí)候基質(zhì)制備可供參考。Moriyama等評(píng)價(jià)了用2mm硅膠制得的TSK膠SuperODS新型反相色譜柱的特性，他們論述了如何分離手性化合物。
Schmid與合作者論述了含飽和脂肪酸鍵合相的合成與性質(zhì)，并且與相應(yīng)的飽和烴固定相的使用作過(guò)比較。Pesek和Matyska合成了兩種不同的二醇鍵合相，包括一種是“可靠的”，另一種通過(guò)將7－辛烯－1，2－二醇直接連接到氫化硅基質(zhì)上。Jino和Nakamura[4]評(píng)價(jià)了用氟處理的鍵合硅膠作為一種反相色譜基質(zhì)與常規(guī)反相色譜基質(zhì)的選擇性不同。Buszewki等比較了烷基胺和烷基鍵合相基質(zhì)用于反相分離，發(fā)現(xiàn)前者對(duì)分離極性化合物效果明顯，但其熱穩(wěn)定性不如后者。Wongyai用苯丙醇胺鍵合到硅膠上產(chǎn)生離子交換--反相基質(zhì)的混合模型，并且評(píng)價(jià)了酸性系列、中性和堿性物質(zhì)的分離效果。Friebe將Calixarene鍵合到硅膠上研究其作為選擇相能夠形成類似于環(huán)糊精的內(nèi)包合物。Chriswanto和伙伴們將聚吡咯相涂在硅膠上作為HPLC的特征化填料。Ge等合成了聚3－辛環(huán)吡咯改性硅膠，評(píng)價(jià)其作為蛋白質(zhì)的分離及探討酸、堿介質(zhì)的穩(wěn)定性。Skapo和Simpson則在活動(dòng)床中制得反相基質(zhì)，他們總結(jié)出在有機(jī)溶劑中通過(guò)這種途徑與常規(guī)鍵合相比較可制得重現(xiàn)性更好的基質(zhì)。Theinpont論述了在HPLC柱中已經(jīng)填裝好的硅膠的衍生化過(guò)程和通過(guò)這種途徑制得的色譜柱和常規(guī)鍵合相色譜柱進(jìn)行了比較。
3.離子交換色譜
離子交換固定相的確研究過(guò)不少，如八十年代初流行的TSK型SW硅膠及基于二乙胺乙基(DEAE)制成的陰離子交換材料用于蛋白質(zhì)及核酸的優(yōu)化分離，低聚糖的分離采用Micro-PakAX-5。XAD樹(shù)脂是色譜中使用最基本的固定相，弱酸、弱堿及兩性電解質(zhì)的分離均有人研究過(guò)，反離子以擴(kuò)散雙電層形式存在。也有人制備多孔甲基丙烯酸鹽離子交換劑，但多數(shù)人愿意使用商
